一種有機固化機質組培金線蓮的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物細胞組織技術，具體涉及一種有機固化機質組培金線蓮的方法。
【背景技術】
[0002]金線蓮別名金線蘭、金絲草，為蘭科開唇植物花葉蘭屬多年生珍稀中草藥，1990年被主產該藥材的福建省省政府列為瀕危藥用植物。它在民間使用非常廣泛，有清熱涼血、祛風利濕、解毒、止痛、鎮咳等功效，主治咯血、支氣管炎、腎炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、風濕性關節炎腫瘤等疑難病癥，在小孩急驚風、去胎毒、保肝護肝、治療糖尿病、乳癌、胃癌方面效果顯著。素有“藥王”、“金草”、“神藥”、“鳥人參”等美稱。經有關部門測定發現，金絲蓮中氨基酸組成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于國產和野生西洋參。幾百年來為歷代皇宮的專用御品。現為賓館、酒家及不少家庭的高檔煲湯材料。
[0003]金線蓮性喜陰涼、潮濕，尤其喜歡生長在有常綠闊葉樹木的溝邊、石壁、土質松散的潮濕地帶，最忌陽光直射。由于其對生態環境要求嚴格，加之近年自然環境遭受嚴重破壞，野生金線蓮越來越少。現有無性繁殖培養出來苗，所形成的根系不具備吸收土壤中營養成分能力，移植土壤時需要經過比較長滯長階段，種植移栽培過程需要洗苗去除基部無機培養基，造成根莖損傷，病原菌侵入，成活率低。
【發明內容】
[0004]本發明的目的在于提供一種有機固化機質組培金線蓮的方法，解決了現有技術中金線蓮培養不易成活等缺點。
[0005]為實現上述目的，本發明采用如下技術方案:
一種有機固化機質組培金線蓮的方法，包括如下步驟:
(1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.%升汞滅菌7-10分鐘，用無菌水沖洗4-5次；
(2)在無菌條件下，將莖切成1-2cm長帶1-2腋芽的節段，接種到誘導培養基上，經過繼代培養的莖切成1-2cm移入有機固化基質中，在每天連續光照12 h，光照強度1500 -3000 lx，培養溫度25 ±1 °C，培養120-125天，形成有效根，促進芽徑增粗和莖、葉的分化；誘導培養基為MS基本培養基中附加6-BA 1.0m g/L,NAA 0.1m g/L和ZT 0.02m g/L。
[0006]所述的有機固化基質含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3 g/L、瓊脂粉3.5g/L。
[0007]本發明的優點在于:本發明培養出高質量的金線蓮有機苗，具有比較完整根系和莖、葉。實現在無菌條件下快繁和栽培磨合適應，這樣培養出來高質量的有機苗，所形成的根系具備吸收土壤中營養成分能力，移植土壤時無需經過滯長階段(傳統培養基成移植土壤時滯長天數在30天左右)，減少種植移栽培過程損傷造成病害侵入，提高成活率(傳統培養基成活率40-50%，有機固化基質成活率90-95%)。解決組織培養金線蓮發根難成活率低，提1?效率，廣品成色好、質量1? O
【附圖說明】
[0008]圖1在有機固化基質中培養的苗。
圖2與有基質融為一體的根系。
[0009]圖3移植土壤的苗。
圖4形成比較完整根系。
【具體實施方式】
[0010]實施例1
一種有機固化機質組培金線蓮的方法，包括如下步驟:
(1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.%升汞滅菌7分鐘，用無菌水沖洗4次；
(2)在無菌條件下，將莖切成Icm長帶I腋芽的節段，接種到誘導培養基上，經過繼代培養的莖切成I cm移入有機固化基質中，在每天連續光照12 h，光照強度1500 lx，培養溫度25 ±1 °C，培養120天，形成有效根，促進芽徑增粗和莖、葉的分化;誘導培養基為MS基本培養基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。
[0011]所述的有機固化基質含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3 g/L、瓊脂粉3.5g/L。
[0012]實施例2
一種有機固化機質組培金線蓮的方法，包括如下步驟:
(1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.%升汞滅菌10分鐘，用無菌水沖洗5次；
(2)在無菌條件下，將莖切成2cm長帶2腋芽的節段，接種到誘導培養基上，經過繼代培養的莖切成2cm移入有機固化基質中，在每天連續光照12 h，光照強度3000 lx，培養溫度25 ±1 °C，培養125天，形成有效根，促進芽徑增粗和莖、葉的分化;誘導培養基為MS基本培養基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。
[0013]所述的有機固化基質含有白糖5g/L、木肩lOOg/L(木肩粗約3毫米見方)、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3 g/L、瓊脂粉3.5g/L。
[0014]實施例3
一種有機固化機質組培金線蓮的方法，包括如下步驟:
(1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 Wt.%升汞滅菌9分鐘，用無菌水沖洗4次；
(2)在無菌條件下，將莖切成Icm長帶1-2腋芽的節段，接種到誘導培養基上，經過繼代培養的莖切成1-2cm移入有機固化基質中，在每天連續光照12 h，光照強度25001x，培養溫度25 ±1 °C，培養122天，形成有效根，促進芽徑增粗和莖、葉的分化;誘導培養基為MS基本培養基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。
[0015]所述的有機固化基質含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3 g/L、瓊脂粉3.5g/L。
[0016]本發明以野生金線蓮為外植體經過繼代培養移入有機固化基質，形成比較完整根系和莖、葉(如圖1)。實現在無菌條件下快繁和栽培磨合適應，這樣培養出來高質量的有機苗，所形成的根系具備吸收土壤中營養成分能力(如圖4)，移植土壤時無需經過滯長階段，減少種植移栽培過程損傷造成病害侵入，提高成活率(如圖3)，成活率達到90%以上。解決組織培養金線蓮發根難成活率低，提高效率，產品成色好、質量高.以上所述僅為本發明的較佳實施例，凡依本發明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應屬本發明的涵蓋范圍。
【主權項】
1.一種有機固化機質組培金線蓮的方法，其特征在于:所述方法包括如下步驟: (1)以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經表面清洗后，放入75%乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.%升汞滅菌7-10分鐘，用無菌水沖洗4-5次； (2)在無菌條件下，將莖切成1-2cm長帶1-2腋芽的節段，接種到誘導培養基上，經過繼代培養的莖切成1-2cm移入有機固化基質中，在每天連續光照12 h，光照強度1500 -3000 lx，培養溫度25 ±1 °C，培養120-125天，形成有效根，促進芽徑增粗和莖、葉的分化；誘導培養基為MS基本培養基中附加6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L和ZT 0.02m g/L。2.根據權利要求1所述的一種有機固化機質組培金線蓮的方法，其特征在于:所述的有機固化基質含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3 g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麥皮麩3g/L、瓊脂粉 3.5g/L。
【專利摘要】本發明涉及一種有機固化機質組培金線蓮的方法，以野生金線蓮為外植體去除根葉的莖段，經表面清洗后，放入75％乙醇中滅菌30秒，再以0.1 wt.％升汞滅菌7?10分鐘，用無菌水沖洗4?5次；在無菌條件下，將莖切成l?2 cm長帶1?2腋芽的節段，接種到誘導培養基上，在每天連續光照12 h，光照強度1500?3000 lx，培養溫度25 ±1℃，培養120?125天，形成有效根，促進芽徑增粗和莖、葉的分化。培養出高質量的有機苗，具有比較完整根系和莖、葉，成活率高。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105706936
【申請號】CN201610145418
【發明人】林成輝, 吳祖建, 俞超維
【申請人】福建農林大學